青藤碱和柳氮磺吡啶对小鼠实验性结肠炎的作用和机制

摘要：目的 探讨青藤碱和柳氮磺吡啶(SASP)对小鼠实验性结肠炎的作用及其机制.方法 70只SPF级雄性昆明小鼠均分为7组,除对照组(不造模、不干预)外,使用恶唑酮将所有小鼠制备成实验性结肠炎模型.造模后,每日分别予模型组、低剂量青藤碱组、高剂量青藤碱组、低剂量联合用药组、高剂量联合用药组、SASP组0.9％氯化钠溶液1 mL、青藤碱(40 mg/kg)、青藤碱(120 mg/kg)、青藤碱(40 mg/kg) +SASP(400 mg/kg)、青藤碱(120 mg/kg) +SASP(400 mg/kg)、SASP(400 mg/kg)灌胃1次,连续7d.记录小鼠粪便性状、体质量变化和粪隐血情况并行疾病活动指数(DAD评分.干预结束后次日处死所有小鼠并留取结肠,行大体损伤评分.于结肠炎性反应或溃疡部位取标本用于组织学检查和损伤评分.用RT-PCR法检测结肠组织丝裂原活化蛋白激酶激酶(MKK)5、ERK5、MKK7、Jun氨基末端激酶(JNK)、NF-κB mRNA的表达水平.组间比较采用t检验.结果 低剂量青藤碱组、高剂量青藤碱组、低剂量联合用药组、高剂量联合用药组、SASP组的DAI分别为2.33±0.77、1.03±0.73、2.70±0.67、1.60±0.66、2.03±0.79,其组织学损伤评分分别为5.50±1.43、4.00±1.49、6.80±1.75、4.80±1.32、5.40±1.58,均低于模型组(3.40±0.66和11.40±1.71),差异均有统计学意义(tDA1=3.33、7.61、2.34、6.08、4.18,t织学损伤评分=8.35、10.31、5.94、9.66、8.15,P均＜0.05).高剂量青藤碱组、高剂量联合用药组、SASP组大体损伤评分(分别为1.40±1.26、1.70±1.06、1.80±1.32)均低于模型组(3.00±1.05),差异均有统计学意义(t=3.07、2.75、2.25,P均＜0.05).在MKK5、ERK5、MKK7、JNK、NF-κB的mRNA表达水平方面,SASP组(分别为24.29±3.40、34.74±3.05、21.34±3.74、18.71±4.12、21.68±2.96)均低于低剂量青藤碱组(分别为51.94±9.16、50.71±11.09、57.98±17.22、55.99±9.65、67.41±10.21),SASP组均低于低剂量联合用药组(分别为72.03±17.44、119.91±47.26、74.09±21.24、71.83±16.91、86.51±18.61),SASP组均高于高剂量青藤碱组(分别为6.53±0.85、17.87±2.74、13.52±2.56、10.41±2.62、13.79±1.43),SASP组均高于高剂量联合用药组(分别为16.80±7.15、21.09±3.92、15.81±1.35、14.11±3.10、16.62±3.15),低剂量青藤碱组均高于高剂量青藤碱组,低剂量联合用药组均高于高剂量联合用药组,低剂量联合用药组均高于低剂量青藤碱组,高剂量联合用药组均高于高剂量青藤碱组,差异均有统计学意义(tMKK5=8.95、8.49、16.01、2.99、15.61、9.26、3.22、4.51,tERK5 =4.41、5.69、13.02、12.81、7.82、6.78、4.50、2.13,tMKK7 =6.58、7.73、5.80、4.40、8.11、6.32、1.86、2.94,tJNK=10.59、7.57、5.37、2.82、13.21、7.57、2.57、2.88,tNF-κB=13.60、10.88、7.60、3.70、16.44、11.71、2.85、2.59;P均＜0.05).结论 青藤碱可有效减轻实验性结肠炎小鼠的炎性反应,其机制可能与ERK5、JNK、NF-κB信号通路有关,且高剂量时疗效可能更优;青藤碱与SASP联用可能存在拮抗作用.