期刊简介
中国科学技术协会主管,中华医学会主办,上海市医学会承办。本刊是消化专业学术期刊,属中华医学会系列杂志之一。以广大消化科医师为主要读者对象,兼顾腹部外科、消化内镜、放射影像、临床检验等相关专业,及时报道消化科领域领先的科研成果和临床诊疗经验,以及对消化科临床有指导作用、且与消化科临床密切结合的基础理论研究,对从事消化科专业的临床医师有指导作用。
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- 杂志名称:中华消化杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中华医学会
- 国际刊号:0254-1432
- 国内刊号:31-1367/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
小干扰RNA抑制缺氧诱导因子-1α表达对食管癌细胞糖酵解的影响
唐娜娜;朱宏;何桂钧;郝波;施瑞华
关键词:缺氧诱导因子1, α亚基, 糖酵解, RNA, 小分子干扰, 食管肿瘤
摘要:目的 观察人食管鳞状细胞癌细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对糖酵解的影响并探讨其可能的作用机制.方法 TEl3、Ecal09细胞常氧(O2体积分数为0.20)及缺氧(O2体积分数为0.01)培养,缺氧时间为6、12、24、48 h,RNA干扰法稳定静默HIF-1α获得TE13/小干扰(si)HIF、Eca109/siHIF细胞,培养方法和时间同TE13、Eca109.Western印迹法检测HIF-1α的表达变化;分光光度法检测培养上清液中乳酸浓度变化;实时定量PCR检测葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)的mRNA表达变化;Western印迹法检测GLUT-1、LDHA蛋白表达变化.t或t'检验用于分析不同缺氧时间对HIF-1α蛋白表达的影响,组间差异比较采用单因素方差分析.结果 TE13、Eca109细胞缺氧后HIF-1α表达增强,12h达高峰(t=6.11,8.31,P<0.05).常氧条件下,TE13/siHIF和Eca109/siHIF细胞乳酸分泌分别为(1.24±0.33)、(1.28±0.37) mmol/L,较TE13和Eca109细胞显著下降[(3.25±1.34)、(4.91±1.69) mmol/L,t=2.53、3.59,P均<0.05];TE13、Eca109细胞缺氧后乳酸分泌增多[(6.48±1.73)、(8.02±1.95) mmol/L,t=2.715、2.050,P均<0.05],TE13/siHIF、Eca109/siHIF细胞缺氧后乳酸分泌无明显增多(P>0.05).TE13/siHIF和Eca109/siHIF细胞中,GLUT-1、LDHA的mRNA表达均明显受抑(常氧:t=6.98、3.92、7.25、3.67,P均<0.05),GLUT-1蛋白表达明显减弱(常氧:t=4.57、16.56,缺氧:t=6.19、6.09,P均<0.05),LDHA蛋白表达稍减弱(P>0.05).结论 抑制人食管鳞状细胞癌中HIF-1α可降低细胞的糖酵解水平,该途径可能涉及GLUT-1、LDHA的表达抑制;除HIF-1α以外,LDHA的蛋白表达可能同时存在其他调控因素.
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