期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办，上海市医学会承办。本刊是消化专业学术期刊，属中华医学会系列杂志之一。以广大消化科医师为主要读者对象，兼顾腹部外科、消化内镜、放射影像、临床检验等相关专业，及时报道消化科领域领先的科研成果和临床诊疗经验，以及对消化科临床有指导作用、且与消化科临床密切结合的基础理论研究，对从事消化科专业的临床医师有指导作用。
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- 杂志名称：中华消化杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0254-1432
- 国内刊号：31-1367/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
黏蛋白4 mRNA与人端粒酶反转录酶mRNA联合转染树突状细胞诱导抗胰腺癌免疫反应的体外研究
陈江；郭晓钟；胡志刚；李宏宇；王迪；赵佳钧
关键词：树突细胞, 黏蛋白类, 端粒, 末端转移酶, RNA, 信使, 胰腺肿瘤, T淋巴细胞, 细胞毒性
摘要：目的 研究人胰腺癌黏蛋白4 mRNA与人端粒酶反转录酶(hTERT) mRNA联合转染树突状细胞(DC)诱导的抗肿瘤免疫反应,为构建负载多抗原表位DC疫苗治疗胰腺癌提供实验依据.方法 自6例HLA-A2+的胰腺癌患者外周血单个核细胞中分离、培养DC.体外转录和扩增黏蛋白4和hTERT mRNA,电穿孔法将两者分别及联合转染DC,培养48 h.采用实时定量PCR和Western印迹技术检测DC中黏蛋白4和hTERT的表达.用MTT法监测转染前后DC存活率；使用IFN-γ释放试验(ELISA法)检测黏蛋白4 mRNA和(或)hTERT mRNA转染后DC诱导的CTL的活化反应.采用51Cr标准细胞毒实验检测转染黏蛋白4 mRNA和(或)hTERT mRNA后DC诱导的CTL对体外胰腺癌细胞株MiaPaCa-2、Capan-2、AsPC-1和Panc-1细胞的杀伤作用.采用studentt检验进行统计学处理.结果 黏蛋白4 mRNA与hTERT mRNA联合转染后48 h DC中两者的相对表达量分别为30.09±5.24和12.87±3.36,低于其分别转染时的相对表达量(38.54土6.21和36.35+5.03,t=3.469、6.721,P均＜0.05).黏蛋白4 mRNA与hTERT mRNA联合转染后96h DC存活率降至52.17％,低于分别转染时DC的存活率(均为80％左右).黏蛋白4和hTERT mRNA联合转染DC诱导的特异性CTL 24 h IFN-γ释放量达(32.57±2.01) U/mL,高于分别转染时DC诱导的CTL IFN-γ释放水平[(23.06±4.74) U/mL和(16.82±3.67) U/mL,t=5.092和7.1 11,P均＜0.05].DC经黏蛋白4 mRNA与hTERT mRNA联合转染后,可有效诱导HLA-A2-黏蛋白4+/hTERT+特异性CTL免疫反应,而对HLA-A2-的胰腺癌细胞无显著杀伤作用.结论 黏蛋白4 mRNA与hTERT mRNA联合转染的DC较单胰腺癌抗原负载DC诱导出更加显著的CTL抗肿瘤免疫.
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