期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办，上海市医学会承办。本刊是消化专业学术期刊，属中华医学会系列杂志之一。以广大消化科医师为主要读者对象，兼顾腹部外科、消化内镜、放射影像、临床检验等相关专业，及时报道消化科领域领先的科研成果和临床诊疗经验，以及对消化科临床有指导作用、且与消化科临床密切结合的基础理论研究，对从事消化科专业的临床医师有指导作用。
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首页>中华消化杂志
- 杂志名称：中华消化杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0254-1432
- 国内刊号：31-1367/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
重组腺病毒Ad/siRNA/环氧合酶-2的构建及其抑制食管癌细胞的效果
赵晖；顾晓萌
关键词：RNA干扰, 环氧合酶-2沉默, 食管肿瘤, 细胞生长
摘要：目的观察腺病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术对人食管鳞癌细胞(Eca-109)环氧合酶(COX)-2基因表达的抑制效果及其对Eca-109细胞生长的影响.方法采用含RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的质粒pSUPER构建针对人COX-2 mRNA的重组质粒psiRNA/COX-2.Not Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切psiRNA/COX-2得到siRNA/COX-2表达片段,定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack的相同位点得到pAdTrack/siRNA/COX-2,后者与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组得到腺病毒Ad/siRNA/COX-2,经293细胞包装、扩增后转染Eca-109细胞.ELISA法测定培养液上清的前列腺素(PG)E2浓度,PCR法检测细胞COX-2 mRNA水平,流式细胞仪检测细胞凋亡与周期分布,绘制细胞生长曲线.结果重组腺病毒Ad/siRNA/COX-2构建成功,转染Eca-109细胞后,细胞COX-2 mRNA水平下降71.7%(P＜0.01),培养液上清PGE2浓度下降62.0%(P＜0.01);细胞生长明显减缓,G0-G1期细胞比例增加、S期与G2-M期细胞比例减少(P＜0.01),细胞凋亡增多(P＜0.01).结论腺病毒介导的RNAi技术可显著抑制人食管鳞癌细胞COX-2基因表达,从而导致肿瘤细胞增殖减缓、凋亡增加.
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