期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办，上海市医学会承办。本刊是消化专业学术期刊，属中华医学会系列杂志之一。以广大消化科医师为主要读者对象，兼顾腹部外科、消化内镜、放射影像、临床检验等相关专业，及时报道消化科领域领先的科研成果和临床诊疗经验，以及对消化科临床有指导作用、且与消化科临床密切结合的基础理论研究，对从事消化科专业的临床医师有指导作用。
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- 杂志名称：中华消化杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0254-1432
- 国内刊号：31-1367/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因减毒鼠伤寒沙门疫苗菌的构建和鉴定
关键词：幽门螺杆菌, ureB基因, 鼠伤寒沙门菌, 疫苗, 遗传重组
摘要：目的构建表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因的重组减毒鼠伤寒沙门疫苗菌.方法用PCR扩增ureB基因,经适当酶切-连接反应将其克隆入高效原核表达质粒pTrc99A,进行基因测序,重组质粒鉴定后再导人减毒鼠伤寒沙门菌SL3261,提取重组疫苗菌质粒,PCR和酶切鉴定,筛选阳性克隆.重组ureB能在宿主菌中表达,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和薄层扫描进行蛋白分析.重组菌C57BL/6小鼠喂灌,分批2 d和10 d后处死小鼠,取脾和末段回肠进行细菌培养,挑菌落提质粒鉴定.结果构建携带ureB的重组原核表达质粒pTrc99A-ureB,并将后者成功转化入减毒鼠伤寒沙门菌SL3261,阳性克隆经PCR和酶切证实.SDS-PAGE电泳和薄层扫描分析表明,重组菌SL3261(pTrc99A-ureB)表达相对分子质量为66×103的ureB,约占菌体蛋白总量的26%.小鼠重组菌喂灌2 d或10 d后,脾和末段回肠均发现携目的基因的菌落.结论构建表达Hp ureB的减毒鼠伤寒沙门疫苗菌,为探索制备Hp口服活疫苗奠定了基础.
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